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PCR实验室工作中需要注意哪些问题?

 更新时间:2020-05-20    点击量:5009

PCR实验室是分子诊断的基础,也是进行PCR实验的*场所。近些年,分子诊断行业快速发展,使得很多IVD从业者对PCR的认识又进入到了一个新的阶段,但是基于实验室的基本知识仍然是非常重要的一环。

PCR实验室工作中的注意事项


(一)试剂储存和准备区

贮存试剂和用于标本制备的消耗品等材料应当直接运送至试剂贮存和准备区,不能经过扩增检测区,试剂盒中的阳性对照品及质控品不应当保存在该区,应当保存在标本处理区。  

(二)标本制备区

由于在样本混合、核酸纯化过程中可能会发生气溶胶所致的污染,可通过在本区内设立正压条件,避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染,加入待测核酸后,必须盖好含反应混合液的反应管。对具有潜在传染危险性的材料,必须在生物柜内开盖,并有明确的样本处理和灭活程序。

(三)扩增区

为避免气溶胶所致的污染,应当尽量减少在本区内的走动。必须注意的是,所有经过检测的反应管不得在此区域打开。

(四)扩增产物分析区

核酸扩增后产物的分析方法多种多样,如膜上或微孔板或芯片上探针杂交方法(放射性核素标记或非放射性核素标记)、直接或酶切后琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法、质谱分析等。

本区是主要的扩增产物污染来源,因此必须注意避免通过本区的物品及工作服将扩增产物带出。在使用PCR-ELISA方法检测扩增产物时,必须使用洗板机洗板,废液必须收集至1 mol/L HCl中,并且不能在实验室内倾倒,而应当至远离PCR实验室的地方弃掉。

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